如何清潔或再生色譜柱？

背壓增加、保留時(shí)間變化和柱性能損失都是色譜柱入口篩板、色譜柱或固定相表面沉積物的常見(jiàn)癥狀。大多數(shù)情況下，這些問(wèn)題可以通過(guò)使用正確的洗滌程序來(lái)克服。越早使用色譜柱再生程序，您就越有可能恢復(fù)色譜柱的原始性能。在色譜柱的溶劑入口端收集強(qiáng)吸附物質(zhì)，在許多情況下，洗滌過(guò)程中使用反向流動(dòng)是有益的。與人們普遍認(rèn)為的相反，逆流永遠(yuǎn)不會(huì)損害填料良好的色譜柱。提到的流動(dòng)方向通常是色譜柱最初填充的方向。請(qǐng)注意，不規(guī)則/無(wú)定形原始二氧化硅在逆流時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，因?yàn)榭赡軙?huì)重新構(gòu)造填充床。當(dāng)在這些不規(guī)...

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如何處理背壓增加的問(wèn)題

當(dāng)進(jìn)行液相色譜實(shí)驗(yàn)時(shí)，遇到背壓增加的問(wèn)題是非常常見(jiàn)的。這種問(wèn)題通常會(huì)影響您的分析結(jié)果，因此需要及時(shí)的處理。下面介紹一些處理背壓增加問(wèn)題的方法。1.檢查保護(hù)柱和分析柱背壓增加通常表明保護(hù)柱或分析柱有問(wèn)題。您可以首先卸下保護(hù)柱（如果您正在使用保護(hù)柱）并用新柱更換舊柱。如果恢復(fù)到原來(lái)的壓力，問(wèn)題就解決了。如果壓力仍然很高，可以通過(guò)斷開(kāi)分析柱與系統(tǒng)的連接，對(duì)其進(jìn)行反沖洗（進(jìn)行此操作時(shí)不要將柱連接到檢測(cè)器），并通過(guò)柱運(yùn)行幾個(gè)柱體積的流動(dòng)相。2.柱的再生如果問(wèn)題仍然存在，您的色譜柱中可能...

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實(shí)用方法：解決HPLC分析中出現(xiàn)無(wú)峰、小峰或負(fù)峰問(wèn)題

在HPLC分析中，出現(xiàn)無(wú)峰、小峰或負(fù)峰是常見(jiàn)的問(wèn)題。這些問(wèn)題通常是由于實(shí)驗(yàn)條件的不當(dāng)、樣品制備方式不當(dāng)、儀器使用問(wèn)題、列柱相關(guān)問(wèn)題等原因所引起的。針對(duì)此類(lèi)問(wèn)題，應(yīng)該優(yōu)先考慮解決以下幾點(diǎn):檢查檢測(cè)器燈是否亮起。有時(shí)候，不能檢測(cè)到某些組分是因?yàn)闄z測(cè)器未開(kāi)啟或者沒(méi)有正確安裝。檢查泵和積分器之間的連接是否松散或斷線。如果連接不緊密可能會(huì)導(dǎo)致流量變小或者樣品流動(dòng)不均勻，進(jìn)而導(dǎo)致無(wú)峰、小峰等問(wèn)題。檢查泵是否打開(kāi)，流向是否正確。通常，泵應(yīng)該流向色譜柱而不是廢液。如果泵流向錯(cuò)誤，可能會(huì)導(dǎo)致無(wú)...

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過(guò)濾頭生銹對(duì)HPLC分析的影響及解決方法

當(dāng)溶劑中的過(guò)濾頭生銹時(shí)，銹可以被認(rèn)為是一種顆粒物污染，這種污染會(huì)影響HPLC分析結(jié)果，導(dǎo)致拖尾、柱壓上升等現(xiàn)象。除此之外，溶解在溶劑中的金屬離子可以通過(guò)色譜柱被沖出而不在柱子中保留，因此對(duì)固定相或硅膠基質(zhì)不會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)。雖然金屬離子不會(huì)和柱子發(fā)生反應(yīng)，但它們也會(huì)對(duì)HPLC分析產(chǎn)生負(fù)面影響，如下所示：1.降低柱子壽命雖然金屬離子對(duì)柱子材料的化學(xué)性質(zhì)沒(méi)有直接影響，但它們可能對(duì)流動(dòng)相產(chǎn)生一定的化學(xué)反應(yīng)，可能會(huì)導(dǎo)致柱子磨損和老化。這些反應(yīng)可能會(huì)導(dǎo)致柱子失去分離能力和分辨率。2.影響色譜...

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HPLC中基線漂移或噪聲的原因及解決方法

HPLC(高效液相色譜)是一種重要的分離技術(shù)，但很多時(shí)候會(huì)面臨基線漂移或噪聲的問(wèn)題，這對(duì)于結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性都會(huì)產(chǎn)生影響。那么這些問(wèn)題的原因是什么呢？接下來(lái)我們將逐一分析，并提供相應(yīng)的解決方法。造成基線漂移或噪聲的原因：1.柱子老化HPLC柱子是一個(gè)重要的組成部分，如果柱子使用時(shí)間太長(zhǎng)，會(huì)出現(xiàn)老化現(xiàn)象。柱子老化導(dǎo)致了柱子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的改變，從而可能會(huì)改變樣品的流動(dòng)性和柱子的保留能力。2.溶液成分的不穩(wěn)定性有些溶液的成分可能不夠穩(wěn)定，比如溶解劑、水等，甚至是樣品本身的穩(wěn)定性也不夠...

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